മെഴുകുതിരികൾക്കും സോപ്പ് നിർമ്മാണത്തിനുമുള്ള ശുദ്ധമായ സപോഷ്നികോവിയ ഡിവാരികാറ്റ ഓയിൽ റീഡ് ബർണർ ഡിഫ്യൂസറുകൾക്ക് പുതിയ ഡിഫ്യൂസർ അവശ്യ എണ്ണ

ഹ്രസ്വ വിവരണം:

 

2.1 എസ്ഡിഇയുടെ തയ്യാറെടുപ്പ്

SD യുടെ റൈസോമുകൾ ഹാൻഹെർബ് കമ്പനിയിൽ നിന്ന് (ഗുരി, കൊറിയ) ഉണങ്ങിയ സസ്യമായി വാങ്ങിയതാണ്. കൊറിയ ഇൻസ്റ്റിറ്റ്യൂട്ട് ഓഫ് ഓറിയൻ്റൽ മെഡിസിനിലെ (KIOM) ഡോ. ഗോ-യാ ചോയിയാണ് സസ്യ വസ്തുക്കളെ വർഗ്ഗീകരണപരമായി സ്ഥിരീകരിച്ചത്. ഒരു വൗച്ചർ മാതൃക (നമ്പർ 2014 SDE-6) കൊറിയൻ ഹെർബേറിയം ഓഫ് സ്റ്റാൻഡേർഡ് ഹെർബൽ റിസോഴ്‌സിൽ നിക്ഷേപിച്ചു. SD (320 ഗ്രാം) ഉണക്കിയ റൈസോമുകൾ 70% എത്തനോൾ (2 മണിക്കൂർ റിഫ്ലക്സ് ഉള്ളത്) ഉപയോഗിച്ച് രണ്ടുതവണ വേർതിരിച്ചെടുക്കുകയും സത്തിൽ കുറഞ്ഞ സമ്മർദ്ദത്തിൽ കേന്ദ്രീകരിക്കുകയും ചെയ്തു. തിളപ്പിച്ചും ഫിൽട്ടർ ചെയ്തു, ലയോഫിലൈസ് ചെയ്തു, 4 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസിൽ സൂക്ഷിക്കുന്നു. ക്രൂഡ് സ്റ്റാർട്ടിംഗ് മെറ്റീരിയലുകളിൽ നിന്നുള്ള ഉണക്കിയ സത്തിൽ വിളവ് 48.13% ആയിരുന്നു (w/w).

 

2.2 ക്വാണ്ടിറ്റേറ്റീവ് ഹൈ-പെർഫോമൻസ് ലിക്വിഡ് ക്രോമാറ്റോഗ്രഫി (HPLC) വിശകലനം

എച്ച്പിഎൽസി സിസ്റ്റവും (വാട്ടേഴ്സ് കോ., മിൽഫോർഡ്, എംഎ, യുഎസ്എ) ഫോട്ടോഡയോഡ് അറേ ഡിറ്റക്ടറും ഉപയോഗിച്ച് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫിക് വിശകലനം നടത്തി. SDE-യുടെ HPLC വിശകലനത്തിനായി, പ്രൈം-Oകൊറിയൻ പ്രൊമോഷൻ ഇൻസ്റ്റിറ്റ്യൂട്ട് ഫോർ ട്രഡീഷണൽ മെഡിസിൻ ഇൻഡസ്ട്രിയിൽ നിന്ന് (ഗ്യോങ്‌സാൻ, കൊറിയ) നിന്നും ഗ്ലൂക്കോസൈൽസിമിഫുജിൻ സ്റ്റാൻഡേർഡ് വാങ്ങിയിട്ടുണ്ട്.സെക്കൻ്റ്-ഒ-ഗ്ലൂക്കോസിൽഹമൗഡോളും 4′-O-β-ഡി-ഗ്ലൂക്കോസിൽ-5-O-മെഥൈൽവിസാമിനോൾ ഞങ്ങളുടെ ലബോറട്ടറിയിൽ വേർതിരിച്ചെടുക്കുകയും സ്പെക്ട്രൽ അനാലിസിസ് വഴി തിരിച്ചറിയുകയും ചെയ്തു, പ്രാഥമികമായി എൻഎംആർ, എംഎസ്.

SDE സാമ്പിളുകൾ (0.1 മില്ലിഗ്രാം) 70% എത്തനോളിൽ (10 മില്ലി) അലിഞ്ഞു. ഒരു XSelect HSS T3 C18 കോളം (4.6 × 250 mm, 5) ഉപയോഗിച്ച് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫിക് വേർതിരിക്കൽ നടത്തിμm, വാട്ടർസ് കോ., മിൽഫോർഡ്, MA, USA). മൊബൈൽ ഘട്ടത്തിൽ അസെറ്റോണിട്രൈലും (A) 0.1% അസറ്റിക് ആസിഡും വെള്ളത്തിൽ (B) 1.0 mL/min എന്ന ഫ്ലോ-റേറ്റിൽ അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു. ഒരു മൾട്ടിസ്റ്റെപ്പ് ഗ്രേഡിയൻ്റ് പ്രോഗ്രാം ഇനിപ്പറയുന്ന രീതിയിൽ ഉപയോഗിച്ചു: 5% A (0 മിനിറ്റ്), 5-20% A (0-10 മിനിറ്റ്), 20% A (10-23 മിനിറ്റ്), 20-65% A (23-40 മിനിറ്റ് ). കണ്ടെത്തൽ തരംഗദൈർഘ്യം 210-400 nm-ൽ സ്കാൻ ചെയ്യുകയും 254 nm-ൽ രേഖപ്പെടുത്തുകയും ചെയ്തു. കുത്തിവയ്പ്പ് അളവ് 10.0 ആയിരുന്നുμഎൽ. മൂന്ന് ക്രോമോണുകളുടെ നിർണ്ണയത്തിനുള്ള സ്റ്റാൻഡേർഡ് സൊല്യൂഷനുകൾ 7.781 mg/mL എന്ന അന്തിമ സാന്ദ്രതയിലാണ് തയ്യാറാക്കിയത് (പ്രിം-O-glucosylcimifugin), 31.125 mg/mL (4′-O-β-ഡി-ഗ്ലൂക്കോസിൽ-5-O-മെഥൈൽവിസാമിനോൾ), കൂടാതെ 31.125 mg/mL (സെക്കൻ്റ്-ഒ-glucosylhamaudol) മെഥനോളിൽ 4 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസിൽ സൂക്ഷിക്കുന്നു.

2.3 ആൻറി-ഇൻഫ്ലമേറ്ററി പ്രവർത്തനത്തിൻ്റെ വിലയിരുത്തൽഇൻ വിട്രോ

2.3.1. കോശ സംസ്ക്കാരവും മാതൃകാ ചികിത്സയും

RAW 264.7 സെല്ലുകൾ അമേരിക്കൻ ടൈപ്പ് കൾച്ചർ കളക്ഷനിൽ നിന്ന് (ATCC, Manassas, VA, USA) നിന്നും 1% ആൻ്റിബയോട്ടിക്കുകളും 5.5% FBS ഉം അടങ്ങിയ DMEM മീഡിയത്തിൽ വളർന്നു. 37 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസിൽ 5% CO2 ൻ്റെ ഈർപ്പമുള്ള അന്തരീക്ഷത്തിൽ കോശങ്ങൾ ഇൻകുബേറ്റ് ചെയ്തു. കോശങ്ങളെ ഉത്തേജിപ്പിക്കുന്നതിനായി, മീഡിയം പുതിയ DMEM മീഡിയം ഉപയോഗിച്ച് മാറ്റി, ലിപ്പോപോളിസാക്കറൈഡ് (LPS, സിഗ്മ-ആൽഡ്രിച്ച് കെമിക്കൽ കോ., സെൻ്റ് ലൂയിസ്, MO, USA) 1-ന് നൽകി.μSDE (200 അല്ലെങ്കിൽ 400) സാന്നിധ്യത്തിലോ അഭാവത്തിലോ g/mL ചേർത്തുμg/mL) അധികമായി 24 മണിക്കൂർ.

2.3.2. നൈട്രിക് ഓക്സൈഡ് (NO), പ്രോസ്റ്റാഗ്ലാൻഡിൻ E2 (PGE2), ട്യൂമർ നെക്രോസിസ് ഘടകം-α(ടിഎൻഎഫ്-α), ഇൻ്റർലൂക്കിൻ-6 (IL-6) ഉത്പാദനം

കോശങ്ങളെ എസ്‌ഡിഇ ഉപയോഗിച്ച് ചികിത്സിക്കുകയും 24 മണിക്കൂർ എൽപിഎസ് ഉപയോഗിച്ച് ഉത്തേജിപ്പിക്കുകയും ചെയ്തു. മുൻ പഠനമനുസരിച്ച് ഗ്രീസ് റീജൻ്റ് ഉപയോഗിച്ച് നൈട്രൈറ്റ് അളക്കുന്നതിലൂടെ ഉൽപ്പാദനം ഒന്നും വിശകലനം ചെയ്തിട്ടില്ല [12]. കോശജ്വലന സൈറ്റോകൈനുകളുടെ സ്രവണം PGE2, TNF-α, കൂടാതെ നിർമ്മാതാവിൻ്റെ നിർദ്ദേശങ്ങൾക്കനുസരിച്ച് ഒരു ELISA കിറ്റ് (R&D സിസ്റ്റങ്ങൾ) ഉപയോഗിച്ചാണ് IL-6 നിർണ്ണയിച്ചത്. NO, സൈറ്റോകൈൻ ഉൽപ്പാദനം എന്നിവയിൽ SDE യുടെ ഫലങ്ങൾ 540 nm അല്ലെങ്കിൽ 450 nm-ൽ ഒരു Valac EnVision ഉപയോഗിച്ച് നിർണ്ണയിക്കപ്പെട്ടു.™മൈക്രോപ്ലേറ്റ് റീഡർ (പെർക്കിൻ എൽമർ).

2.4 ആൻറിഓസ്റ്റിയോ ആർത്രൈറ്റിസ് പ്രവർത്തനത്തിൻ്റെ വിലയിരുത്തൽവിവോയിൽ

2.4.1. മൃഗങ്ങൾ

ആൺ സ്പ്രാഗ്-ഡാവ്ലി എലികളെ (7 ആഴ്ച പ്രായമുള്ളത്) Samtako Inc. (Osan, Korea) ൽ നിന്ന് വാങ്ങുകയും 12-h പ്രകാശം/ഇരുണ്ട ചക്രം ഉപയോഗിച്ച് നിയന്ത്രിത സാഹചര്യങ്ങളിൽ പാർപ്പിക്കുകയും ചെയ്തു.°C ഒപ്പം% ഈർപ്പം. എലികൾക്ക് ലബോറട്ടറി ഭക്ഷണവും വെള്ളവും നൽകിആഡ് ലിബിറ്റം. നാഷണൽ ഇൻസ്റ്റിറ്റ്യൂട്ട് ഓഫ് ഹെൽത്ത് (എൻഐഎച്ച്) മാർഗ്ഗനിർദ്ദേശങ്ങൾ പാലിച്ചാണ് എല്ലാ പരീക്ഷണാത്മക നടപടിക്രമങ്ങളും നടത്തിയത്, ഡെയ്ജിയോൺ യൂണിവേഴ്സിറ്റിയുടെ (ഡേജിയോൺ, റിപ്പബ്ലിക് ഓഫ് കൊറിയ) മൃഗസംരക്ഷണ, ഉപയോഗ സമിതി അംഗീകരിച്ചു.

2.4.2. എലികളിൽ എംഐഎയുമായുള്ള ഒഎയുടെ ഇൻഡക്ഷൻ

പഠനം ആരംഭിക്കുന്നതിന് മുമ്പ് മൃഗങ്ങളെ ക്രമരഹിതമാക്കുകയും ചികിത്സാ ഗ്രൂപ്പുകളിലേക്ക് നിയോഗിക്കുകയും ചെയ്തു (ഓരോ ഗ്രൂപ്പിനും). MIA പരിഹാരം (3 mg/50μകെറ്റാമൈൻ, സൈലാസൈൻ എന്നിവയുടെ മിശ്രിതം ഉപയോഗിച്ച് പ്രേരിപ്പിച്ച അനസ്തേഷ്യയിൽ 0.9% സലൈൻ എൽ) വലതു കാൽമുട്ടിൻ്റെ ഇൻട്രാ ആർട്ടിക്യുലാർ സ്പേസിലേക്ക് നേരിട്ട് കുത്തിവയ്ക്കപ്പെട്ടു. എലികളെ ക്രമരഹിതമായി നാല് ഗ്രൂപ്പുകളായി തിരിച്ചിരിക്കുന്നു: (1) MIA കുത്തിവയ്പ്പില്ലാത്ത സലൈൻ ഗ്രൂപ്പ്, (2) MIA കുത്തിവയ്പ്പുള്ള MIA ഗ്രൂപ്പ്, (3) SDE- ചികിത്സിച്ച ഗ്രൂപ്പ് (200 mg/kg) MIA കുത്തിവയ്പ്പുള്ള ഗ്രൂപ്പ്, കൂടാതെ (4) MIA കുത്തിവയ്പ്പിനൊപ്പം ഇൻഡോമെതസിൻ- (IM-) ചികിത്സിച്ച ഗ്രൂപ്പ് (2 mg/kg). MIA കുത്തിവയ്പ്പിന് 1 ആഴ്ച മുമ്പ് 4 ആഴ്ചത്തേക്ക് എലികൾക്ക് SDE, IM എന്നിവ ഉപയോഗിച്ച് വാമൊഴിയായി നൽകി. ഈ പഠനത്തിൽ ഉപയോഗിച്ച SDE, IM എന്നിവയുടെ അളവ് മുൻ പഠനങ്ങളിൽ ഉപയോഗിച്ചിരുന്നവയെ അടിസ്ഥാനമാക്കിയുള്ളതാണ് [10,13,14].

2.4.3. ഹിൻഡ്‌പാവ് ഭാരം വഹിക്കുന്ന വിതരണത്തിൻ്റെ അളവുകൾ

OA ഇൻഡക്ഷന് ശേഷം, പിൻകാലുകളുടെ ഭാരം വഹിക്കാനുള്ള ശേഷിയിലെ യഥാർത്ഥ ബാലൻസ് തടസ്സപ്പെട്ടു. ഭാരം വഹിക്കുന്ന സഹിഷ്ണുതയിലെ മാറ്റങ്ങൾ വിലയിരുത്താൻ ഒരു ഇൻകപാസിറ്റൻസ് ടെസ്റ്റർ (ലിൻ്റൺ ഇൻസ്ട്രുമെൻ്റേഷൻ, നോർഫോക്ക്, യുകെ) ഉപയോഗിച്ചു. എലികളെ ശ്രദ്ധാപൂർവ്വം അളക്കുന്ന അറയിൽ സ്ഥാപിച്ചു. പിൻകാലുകൾ ചെലുത്തുന്ന ഭാരം വഹിക്കുന്ന ശക്തി 3 സെക്കൻഡ് കാലയളവിൽ ശരാശരി കണക്കാക്കി. ഇനിപ്പറയുന്ന സമവാക്യം ഉപയോഗിച്ചാണ് ഭാരം വിതരണ അനുപാതം കണക്കാക്കുന്നത്: [വലത് പിൻകാലിലെ ഭാരം/(വലത് പിൻകാലിലെ ഭാരം + ഇടത് പിൻകാലിലെ ഭാരം)] × 100 [15].

2.4.4. സെറം സൈറ്റോകൈൻ ലെവലുകളുടെ അളവുകൾ

രക്തസാമ്പിളുകൾ 1,500 ഗ്രാം 10 മിനിറ്റ് 4 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസിൽ കേന്ദ്രീകരിച്ചു; പിന്നീട് സെറം ശേഖരിക്കുകയും ഉപയോഗിക്കുന്നതുവരെ −70°C-ൽ സൂക്ഷിക്കുകയും ചെയ്തു. IL-1 ൻ്റെ ലെവലുകൾβ, IL-6, TNF-α, നിർമ്മാതാവിൻ്റെ നിർദ്ദേശങ്ങൾ അനുസരിച്ച് R&D സിസ്റ്റങ്ങളിൽ നിന്നുള്ള ELISA കിറ്റുകൾ (Minneapolis, MN, USA) ഉപയോഗിച്ചാണ് സെറത്തിലെ PGE2 അളക്കുന്നത്.

2.4.5. തത്സമയ ക്വാണ്ടിറ്റേറ്റീവ് RT-PCR വിശകലനം

TRI reagent® (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) ഉപയോഗിച്ച് കാൽമുട്ട് ജോയിൻ്റ് ടിഷ്യുവിൽ നിന്ന് മൊത്തം RNA വേർതിരിച്ചെടുത്തു, cDNA-യിലേക്ക് റിവേഴ്സ്-ട്രാൻസ്‌ക്രൈബ് ചെയ്യുകയും SYBR പച്ച (Applied Biosystems) ഉള്ള TM വൺ സ്റ്റെപ്പ് RT PCR കിറ്റ് ഉപയോഗിച്ച് PCR-ആംപ്ലിഫൈ ചെയ്യുകയും ചെയ്തു. , ഗ്രാൻഡ് ഐലൻഡ്, NY, USA). അപ്ലൈഡ് ബയോസിസ്റ്റംസ് 7500 റിയൽ-ടൈം പിസിആർ സിസ്റ്റം (അപ്ലൈഡ് ബയോസിസ്റ്റംസ്, ഗ്രാൻഡ് ഐലൻഡ്, എൻവൈ, യുഎസ്എ) ഉപയോഗിച്ചാണ് തത്സമയ ക്വാണ്ടിറ്റേറ്റീവ് പിസിആർ നടത്തിയത്. പ്രൈമർ സീക്വൻസുകളും പ്രോബ്-സീക്വൻസും പട്ടികയിൽ കാണിച്ചിരിക്കുന്നു1. നിർമ്മാതാവിൻ്റെ നിർദ്ദേശങ്ങൾ അനുസരിച്ച് (Applied Biosystems, Foster, CA, USA) DNA പോളിമറേസ് അടങ്ങിയ TaqMan® യൂണിവേഴ്സൽ PCR മാസ്റ്റർ മിശ്രിതം ഉപയോഗിച്ച് സാമ്പിൾ cDNA-കളുടെ അലിക്കോട്ടുകളും GAPDH cDNA-യുടെ തുല്യ അളവും വർദ്ധിപ്പിച്ചു. 50 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസിൽ 2 മിനിറ്റ്, 94 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസിൽ 10 മിനിറ്റ്, 95 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസിൽ 15 സെക്കൻഡ്, 40 സൈക്കിളുകൾക്ക് 60 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസിൽ 1 മിനിറ്റ് എന്നിങ്ങനെയാണ് പിസിആർ അവസ്ഥ. നിർമ്മാതാവിൻ്റെ നിർദ്ദേശങ്ങൾ അനുസരിച്ച് താരതമ്യ Ct (ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ പ്ലോട്ടിനും ത്രെഷോൾഡിനും ഇടയിലുള്ള ക്രോസ്-പോയിൻ്റിലുള്ള ത്രെഷോൾഡ് സൈക്കിൾ നമ്പർ) രീതി ഉപയോഗിച്ചാണ് ടാർഗെറ്റ് ജീനിൻ്റെ സാന്ദ്രത നിർണ്ണയിക്കുന്നത്.

FOB വില:യുഎസ് $0.5 - 9,999 / പീസ്

മിനിമം.ഓർഡർ അളവ്:100 കഷണം/കഷണങ്ങൾ

വിതരണ കഴിവ്:പ്രതിമാസം 10000 കഷണങ്ങൾ/കഷണങ്ങൾ