മെഴുകുതിരി, സോപ്പ് നിർമ്മാണത്തിനുള്ള ശുദ്ധമായ സപോഷ്നിക്കോവിയ ഡിവാരികേറ്റ എണ്ണ, റീഡ് ബർണർ ഡിഫ്യൂസറുകൾക്ക് പുതിയ മൊത്തവ്യാപാര ഡിഫ്യൂസർ അവശ്യ എണ്ണ.

ഹൃസ്വ വിവരണം:

 

2.1. എസ്.ഡി.ഇ തയ്യാറാക്കൽ

SD യുടെ റൈസോമുകൾ ഹാൻഹെർബ് കമ്പനിയിൽ (ഗുരി, കൊറിയ) നിന്ന് ഉണങ്ങിയ സസ്യമായി വാങ്ങി. കൊറിയ ഇൻസ്റ്റിറ്റ്യൂട്ട് ഓഫ് ഓറിയന്റൽ മെഡിസിനിലെ (KIOM) ഡോ. ഗോ-യാ ചോയി സസ്യ വസ്തുക്കളെ വർഗ്ഗീകരണപരമായി സ്ഥിരീകരിച്ചു. ഒരു വൗച്ചർ മാതൃക (നമ്പർ 2014 SDE-6) കൊറിയൻ ഹെർബേറിയം ഓഫ് സ്റ്റാൻഡേർഡ് ഹെർബൽ റിസോഴ്‌സസിൽ നിക്ഷേപിച്ചു. SD യുടെ (320 ഗ്രാം) ഉണങ്ങിയ റൈസോമുകൾ 70% എത്തനോൾ (2 മണിക്കൂർ റിഫ്ലക്സോടെ) ഉപയോഗിച്ച് രണ്ടുതവണ വേർതിരിച്ചെടുത്തു, തുടർന്ന് സത്ത് കുറഞ്ഞ മർദ്ദത്തിൽ കേന്ദ്രീകരിച്ചു. കഷായം ഫിൽട്ടർ ചെയ്ത് ലയോഫിലൈസ് ചെയ്ത് 4°C-ൽ സൂക്ഷിച്ചു. അസംസ്കൃത വസ്തുക്കളിൽ നിന്നുള്ള ഉണങ്ങിയ സത്തിന്റെ വിളവ് 48.13% (w/w) ആയിരുന്നു.

 

2.2. ക്വാണ്ടിറ്റേറ്റീവ് ഹൈ-പെർഫോമൻസ് ലിക്വിഡ് ക്രോമാറ്റോഗ്രഫി (HPLC) വിശകലനം

ഒരു HPLC സിസ്റ്റവും (വാട്ടേഴ്‌സ് കമ്പനി, മിൽഫോർഡ്, MA, USA) ഒരു ഫോട്ടോഡയോഡ് അറേ ഡിറ്റക്ടറും ഉപയോഗിച്ചാണ് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫിക് വിശകലനം നടത്തിയത്. SDE യുടെ HPLC വിശകലനത്തിന്, പ്രൈം-O-ഗ്ലൂക്കോസിൽസിമിഫുജിൻ സ്റ്റാൻഡേർഡ് കൊറിയ പ്രൊമോഷൻ ഇൻസ്റ്റിറ്റ്യൂട്ട് ഫോർ ട്രഡീഷണൽ മെഡിസിൻ ഇൻഡസ്ട്രിയിൽ (ജിയോങ്‌സാൻ, കൊറിയ) നിന്ന് വാങ്ങി, കൂടാതെസെക്കന്റ്-ഒ-ഗ്ലൂക്കോസിൽഹാമൗഡോളും 4′-ഉംO-β-ഡി-ഗ്ലൂക്കോസിൽ-5-O-മെഥൈൽവിസാമിനോൾ ഞങ്ങളുടെ ലബോറട്ടറിയിൽ വേർതിരിച്ചെടുക്കുകയും സ്പെക്ട്രൽ വിശകലനങ്ങൾ വഴി തിരിച്ചറിയുകയും ചെയ്തു, പ്രധാനമായും NMR, MS എന്നിവയിലൂടെ.

എസ്‌ഡി‌ഇ സാമ്പിളുകൾ (0.1 മില്ലിഗ്രാം) 70% എത്തനോളിൽ (10 മില്ലി) ലയിപ്പിച്ചു. ഒരു എക്സ്സെലക്ട് എച്ച്എസ്എസ് ടി3 സി18 കോളം (4.6 × 250 മിമി, 5) ഉപയോഗിച്ച് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫിക് വേർതിരിക്കൽ നടത്തി.μm, വാട്ടേഴ്‌സ് കമ്പനി, മിൽഫോർഡ്, MA, USA). മൊബൈൽ ഘട്ടത്തിൽ 1.0 mL/min എന്ന ഫ്ലോ-റേറ്റിൽ വെള്ളത്തിൽ (B) അസെറ്റോണിട്രൈൽ (A) ഉം 0.1% അസറ്റിക് ആസിഡും അടങ്ങിയിരുന്നു. ഒരു മൾട്ടിസ്റ്റെപ്പ് ഗ്രേഡിയന്റ് പ്രോഗ്രാം ഇനിപ്പറയുന്ന രീതിയിൽ ഉപയോഗിച്ചു: 5% A (0 മിനിറ്റ്), 5–20% A (0–10 മിനിറ്റ്), 20% A (10–23 മിനിറ്റ്), 20–65% A (23–40 മിനിറ്റ്). ഡിറ്റക്ഷൻ തരംഗദൈർഘ്യം 210–400 nm-ൽ സ്കാൻ ചെയ്തു, 254 nm-ൽ രേഖപ്പെടുത്തി. ഇഞ്ചക്ഷൻ വോളിയം 10.0 ആയിരുന്നു.μL. മൂന്ന് ക്രോമോണുകളുടെ നിർണ്ണയത്തിനുള്ള സ്റ്റാൻഡേർഡ് പരിഹാരങ്ങൾ 7.781 mg/mL എന്ന അന്തിമ സാന്ദ്രതയിൽ തയ്യാറാക്കി (പ്രൈം-O-ഗ്ലൂക്കോസിൽസിമിഫുജിൻ), 31.125 മി.ഗ്രാം/മില്ലി (4′-O-β-ഡി-ഗ്ലൂക്കോസിൽ-5-O-മീഥൈൽവിസാമിനോൾ), 31.125 മി.ഗ്രാം/മില്ലി (സെക്കന്റ്-ഒ-ഗ്ലൂക്കോസിൽഹാമൗഡോൾ) മെഥനോളിൽ 4°C-ൽ സൂക്ഷിക്കുന്നു.

2.3. വീക്കം തടയുന്നതിനുള്ള പ്രവർത്തനത്തിന്റെ വിലയിരുത്തൽഇൻ വിട്രോ

2.3.1. കോശ സംസ്‌കാരവും സാമ്പിൾ ചികിത്സയും

അമേരിക്കൻ ടൈപ്പ് കൾച്ചർ കളക്ഷനിൽ (ATCC, Manassas, VA, USA) നിന്ന് RAW 264.7 സെല്ലുകൾ ലഭിച്ചു, അവ 1% ആൻറിബയോട്ടിക്കുകളും 5.5% FBS ഉം അടങ്ങിയ DMEM മീഡിയത്തിൽ വളർത്തി. 37°C താപനിലയിൽ 5% CO2 ന്റെ ഈർപ്പമുള്ള അന്തരീക്ഷത്തിൽ കോശങ്ങൾ ഇൻകുബേറ്റ് ചെയ്തു. കോശങ്ങളെ ഉത്തേജിപ്പിക്കുന്നതിനായി, മീഡിയം പുതിയ DMEM മീഡിയം ഉപയോഗിച്ചും ലിപ്പോപൊളിസാക്കറൈഡ് (LPS, സിഗ്മ-ആൽഡ്രിച്ച് കെമിക്കൽ കമ്പനി, സെന്റ് ലൂയിസ്, MO, USA) ഉപയോഗിച്ചും മാറ്റിസ്ഥാപിച്ചു.μഎസ്‌ഡി‌ഇയുടെ സാന്നിധ്യത്തിലോ അഭാവത്തിലോ ഗ്രാം/എം‌എൽ ചേർത്തു (200 അല്ലെങ്കിൽ 400μഗ്രാം/മില്ലി) അധികമായി 24 മണിക്കൂർ.

2.3.2. നൈട്രിക് ഓക്സൈഡ് (NO), പ്രോസ്റ്റാഗ്ലാൻഡിൻ E2 (PGE2), ട്യൂമർ നെക്രോസിസ് ഘടകം എന്നിവയുടെ നിർണ്ണയം-α(ടിഎൻഎഫ്-α), ഇന്റർല്യൂക്കിൻ-6 (IL-6) ഉത്പാദനം

കോശങ്ങളെ SDE ഉപയോഗിച്ച് ചികിത്സിക്കുകയും LPS ഉപയോഗിച്ച് 24 മണിക്കൂർ ഉത്തേജിപ്പിക്കുകയും ചെയ്തു. മുൻ പഠനമനുസരിച്ച് ഗ്രീസ് റീജന്റ് ഉപയോഗിച്ച് നൈട്രൈറ്റ് അളന്ന് യാതൊരു ഉൽപാദനവും വിശകലനം ചെയ്തില്ല [12]. വീക്കം ഉണ്ടാക്കുന്ന സൈറ്റോകൈനുകളായ PGE2, TNF- കളുടെ സ്രവണം.α, കൂടാതെ നിർമ്മാതാവിന്റെ നിർദ്ദേശങ്ങൾക്കനുസൃതമായി ഒരു ELISA കിറ്റ് (R&D സിസ്റ്റങ്ങൾ) ഉപയോഗിച്ചാണ് IL-6 നിർണ്ണയിച്ചത്. വാലക് എൻവിഷൻ ഉപയോഗിച്ച് NO, സൈറ്റോകൈൻ ഉത്പാദനം എന്നിവയിൽ SDE യുടെ ഫലങ്ങൾ 540 nm അല്ലെങ്കിൽ 450 nm ൽ നിർണ്ണയിച്ചു.™ ™ ക്വസ്റ്റ്മൈക്രോപ്ലേറ്റ് റീഡർ (പെർകിൻഎൽമർ).

2.4. ഓസ്റ്റിയോ ആർത്രൈറ്റിസ് വിരുദ്ധ പ്രവർത്തനത്തിന്റെ വിലയിരുത്തൽഇൻ വിവോ

2.4.1. മൃഗങ്ങൾ

7 ആഴ്ച പ്രായമുള്ള ആൺ സ്പ്രാഗ്-ഡാവ്‌ലി എലികളെ സാംടാക്കോ ഇൻ‌കോർപ്പറേറ്റഡിൽ (ഒസാൻ, കൊറിയ) നിന്ന് വാങ്ങി, 12-മണിക്കൂർ പ്രകാശ/ഇരുട്ട് ചക്രത്തിൽ നിയന്ത്രിത സാഹചര്യങ്ങളിൽ പാർപ്പിച്ചു.°C ഉം% ഈർപ്പം. എലികൾക്ക് ലബോറട്ടറി ഭക്ഷണവും വെള്ളവും നൽകി.ഇഷ്ടാനുസരണം. എല്ലാ പരീക്ഷണ നടപടിക്രമങ്ങളും നാഷണൽ ഇൻസ്റ്റിറ്റ്യൂട്ട് ഓഫ് ഹെൽത്ത് (NIH) മാർഗ്ഗനിർദ്ദേശങ്ങൾ പാലിച്ചുകൊണ്ടും ഡീജിയോൺ സർവകലാശാലയുടെ (ഡീജിയോൺ, റിപ്പബ്ലിക് ഓഫ് കൊറിയ) മൃഗസംരക്ഷണ, ഉപയോഗ കമ്മിറ്റി അംഗീകരിച്ചുകൊണ്ടുമാണ് നടത്തിയത്.

2.4.2. എലികളിൽ MIA യുമായി OA യുടെ ഇൻഡക്ഷൻ

പഠനം ആരംഭിക്കുന്നതിന് മുമ്പ് മൃഗങ്ങളെ ക്രമരഹിതമായി ക്രമീകരിച്ച് ചികിത്സാ ഗ്രൂപ്പുകളിലേക്ക് നിയോഗിച്ചു (ഓരോ ഗ്രൂപ്പിനും). MIA ലായനി (3 mg/50μകെറ്റാമൈൻ, സൈലാസിൻ എന്നിവയുടെ മിശ്രിതം ഉപയോഗിച്ച് അനസ്തേഷ്യയിൽ വലത് കാൽമുട്ടിന്റെ ഇൻട്രാ-ആർട്ടിക്യുലാർ സ്‌പെയ്‌സിലേക്ക് L 0.9% സലൈൻ നേരിട്ട് കുത്തിവച്ചു. എലികളെ ക്രമരഹിതമായി നാല് ഗ്രൂപ്പുകളായി തിരിച്ചിരിക്കുന്നു: (1) MIA കുത്തിവയ്പ്പ് ഇല്ലാത്ത സലൈൻ ഗ്രൂപ്പ്, (2) MIA കുത്തിവയ്പ്പുള്ള MIA ഗ്രൂപ്പ്, (3) MIA കുത്തിവയ്പ്പുള്ള SDE- ചികിത്സിച്ച ഗ്രൂപ്പ് (200 mg/kg), (4) MIA കുത്തിവയ്പ്പുള്ള ഇൻഡോമെതസിൻ- (IM-) ചികിത്സിച്ച ഗ്രൂപ്പ് (2 mg/kg). MIA കുത്തിവയ്പ്പിന് 1 ആഴ്ച മുമ്പ് 4 ആഴ്ചത്തേക്ക് എലികൾക്ക് SDE, IM എന്നിവ വാമൊഴിയായി നൽകി. ഈ പഠനത്തിൽ ഉപയോഗിച്ച SDE, IM എന്നിവയുടെ അളവ് മുൻ പഠനങ്ങളിൽ ഉപയോഗിച്ചവരെ അടിസ്ഥാനമാക്കിയുള്ളതാണ് [10,13,14].

2.4.3. ഹിൻഡ്‌പോ വെയ്റ്റ്-ബെയറിംഗ് ഡിസ്ട്രിബ്യൂഷന്റെ അളവുകൾ

OA ഇൻഡക്ഷനുശേഷം, പിൻകാലുകളുടെ ഭാരം വഹിക്കാനുള്ള കഴിവിലെ പ്രാരംഭ സന്തുലിതാവസ്ഥ തടസ്സപ്പെട്ടു. ഭാരം വഹിക്കാനുള്ള സഹിഷ്ണുതയിലെ മാറ്റങ്ങൾ വിലയിരുത്താൻ ഒരു ഇൻകാപ്പിറ്റൻസ് ടെസ്റ്റർ (ലിൻടൺ ഇൻസ്ട്രുമെന്റേഷൻ, നോർഫോക്ക്, യുകെ) ഉപയോഗിച്ചു. എലികളെ ശ്രദ്ധാപൂർവ്വം അളക്കുന്ന ചേമ്പറിൽ സ്ഥാപിച്ചു. പിൻകാലിൽ ചെലുത്തുന്ന ഭാരം വഹിക്കാനുള്ള ശക്തി 3 സെക്കൻഡ് കാലയളവിൽ ശരാശരി കണക്കാക്കി. ഭാരം വിതരണ അനുപാതം ഇനിപ്പറയുന്ന സമവാക്യം ഉപയോഗിച്ച് കണക്കാക്കി: [വലത് പിൻകാലിലെ ഭാരം/(വലത് പിൻകാലിലെ ഭാരം + ഇടത് പിൻകാലിലെ ഭാരം)] × 100 [15].

2.4.4. സെറം സൈറ്റോകൈൻ ലെവലുകൾ അളക്കൽ

രക്ത സാമ്പിളുകൾ 1,500 ഗ്രാം എന്ന അളവിൽ 4°C താപനിലയിൽ 10 മിനിറ്റ് നേരത്തേക്ക് സെൻട്രിഫ്യൂജ് ചെയ്തു; തുടർന്ന് സെറം ശേഖരിച്ച് ഉപയോഗം വരെ −70°C താപനിലയിൽ സൂക്ഷിച്ചു. IL-1 ന്റെ അളവ്β, ഐഎൽ-6, ടിഎൻഎഫ്-αനിർമ്മാതാവിന്റെ നിർദ്ദേശങ്ങൾ അനുസരിച്ച്, ആർ & ഡി സിസ്റ്റംസിൽ (മിനിയാപൊളിസ്, എംഎൻ, യുഎസ്എ) നിന്നുള്ള ELISA കിറ്റുകൾ ഉപയോഗിച്ചാണ് സെറമിലെ PGE2, βαγαν

2.4.5. റിയൽ-ടൈം ക്വാണ്ടിറ്റേറ്റീവ് ആർടി-പിസിആർ വിശകലനം

TRI reagent® (സിഗ്മ-ആൽഡ്രിച്ച്, സെന്റ് ലൂയിസ്, MO, USA) ഉപയോഗിച്ച് മുട്ട് ജോയിന്റ് ടിഷ്യുവിൽ നിന്ന് മൊത്തം RNA വേർതിരിച്ചെടുത്തു, SYBR ഗ്രീൻ ഉള്ള TM One Step RT PCR കിറ്റ് ഉപയോഗിച്ച് cDNA ആംപ്ലിഫൈ ചെയ്തു (അപ്ലൈഡ് ബയോസിസ്റ്റംസ്, ഗ്രാൻഡ് ഐലൻഡ്, NY, USA). അപ്ലൈഡ് ബയോസിസ്റ്റംസ് 7500 റിയൽ-ടൈം PCR സിസ്റ്റം (അപ്ലൈഡ് ബയോസിസ്റ്റംസ്, ഗ്രാൻഡ് ഐലൻഡ്, NY, USA) ഉപയോഗിച്ച് റിയൽ-ടൈം ക്വാണ്ടിറ്റേറ്റീവ് PCR നടത്തി. പ്രൈമർ സീക്വൻസുകളും പ്രോബ്-സീക്വൻസും പട്ടികയിൽ കാണിച്ചിരിക്കുന്നു.1. നിർമ്മാതാവിന്റെ നിർദ്ദേശങ്ങൾ അനുസരിച്ച് (അപ്ലൈഡ് ബയോസിസ്റ്റംസ്, ഫോസ്റ്റർ, CA, USA) DNA പോളിമറേസ് അടങ്ങിയ TaqMan® യൂണിവേഴ്സൽ PCR മാസ്റ്റർ മിശ്രിതം ഉപയോഗിച്ച് സാമ്പിൾ cDNA-കളുടെയും തുല്യ അളവിലുള്ള GAPDH cDNA-യുടെയും ആൾക്വോട്ടുകൾ ആംപ്ലിഫൈ ചെയ്തു. 50°C-ൽ 2 മിനിറ്റ്, 94°C-ൽ 10 മിനിറ്റ്, 95°C-ൽ 15 സെക്കൻഡ്, 40 സൈക്കിളുകൾക്ക് 60°C-ൽ 1 മിനിറ്റ് എന്നിങ്ങനെയായിരുന്നു PCR അവസ്ഥകൾ. നിർമ്മാതാവിന്റെ നിർദ്ദേശങ്ങൾ അനുസരിച്ച്, താരതമ്യ Ct (ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ പ്ലോട്ടിനും ത്രെഷോൾഡിനും ഇടയിലുള്ള ക്രോസ്-പോയിന്റിലെ ത്രെഷോൾഡ് സൈക്കിൾ നമ്പർ) രീതി ഉപയോഗിച്ചാണ് ലക്ഷ്യ ജീനിന്റെ സാന്ദ്രത നിർണ്ണയിച്ചത്.

എഫ്ഒബി വില:യുഎസ് $0.5 - 9,999 / കഷണം

കുറഞ്ഞ ഓർഡർ അളവ്:100 കഷണങ്ങൾ/കഷണങ്ങൾ

വിതരണ ശേഷി:പ്രതിമാസം 10000 കഷണങ്ങൾ/കഷണങ്ങൾ